氨基酸是生物功能大分子蛋白質(zhì)的基本組成單位,是構(gòu)成動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)所需蛋白質(zhì)的基本物質(zhì)。氨基酸含有一個(gè)堿性氨基和一個(gè)酸性羧基,氨基一般連在a-碳上。組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸除甘氨酸外,都有一個(gè)不對(duì)稱(chēng)碳原子,即a-碳原子。a-碳原子有四個(gè)不同取代基:羧基、氨基、氫原子和R基團(tuán),不同氨基酸的R基團(tuán)不同。每種氨基酸有D-構(gòu)型和L-構(gòu)型,天然蛋白質(zhì)中的氨基酸都是L-構(gòu)型。廣泛存在于食品、藥品、水產(chǎn)品、飼料和體液(血液、尿樣等)。氨基酸分析儀采用專(zhuān)為氨基酸分析特制的輸液泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、檢測(cè)器、柱后衍生系統(tǒng)等部件,這些都有效地提高了氨基酸分析的分離度、檢出限和重復(fù)性。
氨基酸分析儀基本分析原理:各種蛋白質(zhì)都是由20種氨基酸首尾相連,并以一定的順序組成肽鏈。用水解的方法將肽鏈打開(kāi),形成單一的氨基酸進(jìn)行分析。所有的氨基酸在低PH值的條件下都帶有正電荷,在陽(yáng)離子交換樹(shù)脂上均被吸附,但吸附的程度不同,堿性氨基酸結(jié)合力*、其次為芳香族氨基酸、中性氨基酸、酸性氨基酸結(jié)合力最弱。
按照氨基酸分析儀設(shè)定的洗脫程序,用不同離子強(qiáng)度、PH值的緩沖液依次將氨基酸按吸附力的不同洗脫下來(lái)(先酸性氨基酸再中性氨基酸最后堿性氨基酸),被洗脫下來(lái)的氨基酸與茚三酮反應(yīng)液在加熱的條件下反應(yīng),生成可在分光光度計(jì)中570nm和440nm檢測(cè)到的藍(lán)紫色物質(zhì)(仲氨生成淺黃色物質(zhì)440nm檢測(cè)),外標(biāo)法定量。